حاسبة تركيز الحمض النووي / الرنا
احسب تركيز الحمض النووي من قيمة الامتصاصية عند 260 nm باستخدام معاملات التحويل القياسية لـ dsDNA وssDNA والرنا.
كيفية استخدام حاسبة تركيز الحمض النووي
- قِس امتصاصية عينتك عند 260 nm.
- أدخل قيمة A260.
- أدخل معامل التخفيف (1 إذا كانت العينة غير مخففة).
- حدد نوع الحمض النووي.
- انقر على "احسب" للحصول على التركيز بوحدة ng/µL.
حالات الاستخدام
- •قياس تركيز الحمض النووي بعد الاستخلاص أو تنقية PCR.
- •تقييم جودة الرنا قبل إجراء RT-PCR أو التسلسل.
- •تحديد كمية الحمض النووي للاستخدام في تجارب الاستنساخ والنقل الجيني.
الصيغة
الصيغة: التركيز (ng/µL) = A260 × معامل التخفيف × معامل التحويل. المعاملات: dsDNA = 50، ssDNA = 33، RNA = 40.
الأسئلة الشائعة
لماذا يُستخدم 260 nm للأحماض النووية؟
تمتص القواعد النيتروجينية ضوء الأشعة فوق البنفسجية بشكل أقصى عند نحو 260 nm. وهذه الامتصاصية تتناسب تناسبا مباشرا مع تركيز الحمض النووي وفق قانون Beer-Lambert.
ما هي نسبة A260/A280 الجيدة؟
يجب أن تكون نسبة A260/A280 للحمض النووي النقي حوالي 1.8، وللرنا النقي حوالي 2.0. تشير النسب الأدنى إلى تلوث بروتيني. استخدم NanoDrop أو ما شابهه للحصول على تقييم دقيق للنقاء.
إخلاء مسؤولية
للأغراض التعليمية والمختبرية فقط. تفترض تقديرات التركيز وجود محاليل حمض نووي نقية. يمكن للملوثات أن تؤثر تأثيرا كبيرا في قراءات الامتصاصية.